بررسی بیان ژن و خالص سازی زیر واحدهای S100 A8 , S100 A9 کالپروتکتین و بررسی ساختارآنها

Authors

  • اصغری , حمیده
  • ایلغاری , داریوش
  • سهمانی , مهدی
  • غیبی, نعمت الله
Abstract:

  زمینه و هدف: کالپروتکتین، S100 A8 و S100 A9 در فرآیندهای مهمی نظیر پیام رسانی و تنظیم پاسخ های التهابی نقش دارند. در این مطالعه، بیان S100 A8 و S100 A9 بصورت نوترکیب، خالص سازی و بررسی ساختار آنها انجام گردید.   روش کار: در این مطالعه تجربی از pET15b به عنوان حامل توالی کد کننده ژنهای S100 A8, S100 A9 انسانی و از ( E.coli BL21 (DE3  به عنوان میزبان استفاده گردید. بیان ژن و فرآیند خالص سازی از طریق SDS-PAGE مورد ارزیابی قرارگرفت. خالص سازی پروتئینها با استفاده از رزین Ni-NTA و بر اساس میل ترکیبی آن به His-Tag پروتئین های نوترکیب انجام گرفت. ساختار سوم پروتئین ها با طیف سنج فلورسانس بررسی شد.   یافته ها: زیر واحدهای مذکور 4-3 ساعت بعد از القاء و دمای 37 درجه سانتی گراد بیان بالایی را نشان دادند. درصد بالایی از پروتئین S100A9 در فاز اینکلوژن بادی نشان داده شد، در حالیکه زیر واحد S100A8 عمدتا بصورت محلول بیان گردید. S100A8 و S100A9 در غلظت mM 100 ایمیدازول خالص سازی گردید. در بررسی طیف سنجی نشان داده شد که اسید آمینه تریپتوفان در ساختار های داخلی قرار گرفته و کمتر در معرض محیط آبی است.   نتیجه گیری: در این مطالعه زیر واحدهای S100A8 و S100A9 بصورت نوترکیب بیان شده و تخلیص گردید. همچنین، ساختار آنها مورد تایید قرار گرفت.

Upgrade to premium to download articles

Sign up to access the full text

Already have an account?login

similar resources

بررسی بیان ژن و خالص سازی زیر واحدهای s۱۰۰ a۸ , s۱۰۰ a۹ کالپروتکتین و بررسی ساختارآنها

زمینه و هدف: کالپروتکتین، s100 a8 و s100 a9 در فرآیندهای مهمی نظیر پیام رسانی و تنظیم پاسخ های التهابی نقش دارند. در این مطالعه، بیان s100 a8 و s100 a9 بصورت نوترکیب، خالص سازی و بررسی ساختار آنها انجام گردید.   روش کار: در این مطالعه تجربی از pet15b به عنوان حامل توالی کد کننده ژنهای s100 a8, s100 a9 انسانی و از ( e.coli bl21 (de3  به عنوان میزبان استفاده گردید. بیان ژن و فرآیند خالص سازی از ط...

full text

S100A9 (S100 calcium binding protein A9)

Note S100A9 belongs to the S100/calgranulin family of small non-ubiquitous cytoplasmic Ca-binding proteins of EF-hand type. The proteins were referred to "S100" because of their solubility in saturated ammonium sulphate solution. Sixteen of 21 members are localised in a cluster on human chromosome 1q21. The clustered organization of these S100 genes is conserved during evolution (Ridinger et al...

full text

Diagnostic Value of Fecal Calprotectin (S100 A8/A9) Test in Children with Chronic Abdominal Pain

Objectives. The aim of the study was to establish whether fecal calprotectin concentration (FCC) may be useful in children with chronic abdominal pain to differentiate between inflammatory bowel disease (IBD), other inflammatory gastrointestinal disorders, and functional gastrointestinal disorders. Methods. The study included 163 patients (median age 13 years), who were assigned to four study g...

full text

Neutrophil-derived S100 calcium-binding proteins A8/A9 promote reticulated thrombocytosis and atherogenesis in diabetes.

Platelets play a critical role in atherogenesis and thrombosis-mediated myocardial ischemia, processes that are accelerated in diabetes. Whether hyperglycemia promotes platelet production and whether enhanced platelet production contributes to enhanced atherothrombosis remains unknown. Here we found that in response to hyperglycemia, neutrophil-derived S100 calcium-binding proteins A8/A9 (S100A...

full text

Elevation of human alpha-defensins and S100 calcium-binding proteins A8 and A9 in tear fluid of patients with pterygium.

PURPOSE The pathogenesis of pterygia is still not well understood. Recent studies suggest that it may be associated with inflammation and progressive proliferation triggered by ultraviolet radiation. In this study the authors determined that the inflammatory nature of pterygium is reflected in the protein components of tears. METHODS Consent for this study was obtained from 12 patients (avera...

full text

PReS-FINAL-2068: S100 A8/A9 serum levels reflect disease activity in juvenile idiopathic arthritis-associated uveitis

Methods Serum samples were collected from patients with juvenile idiopathic arthritis-associated uveitis (JIAU, n = 97), idiopathic anterior uveitis (IAU, n = 26), idiopathic intermediate uveitis (IIU, n = 36), anterior herpes uveitis (n = 3), and healthy controls (n = 10). In 29 patients, aqueous humor was available for analysis. S100 levels were measured by ELISA and were correlated with dise...

full text

My Resources

Save resource for easier access later

Save to my library Already added to my library

{@ msg_add @}


Journal title

volume 14  issue 2

pages  107- 117

publication date 2014-06

By following a journal you will be notified via email when a new issue of this journal is published.

Keywords

No Keywords

Hosted on Doprax cloud platform doprax.com

copyright © 2015-2023